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您好,欢迎光临睿铂赛!

    我们所搭架的平台是专业从事生命科学研究技术服务的科研中心目前主要从事分子生物学和细胞生物学相关领域的技术服务,为客户提供从课题立项、设计、实验技术完成的整体外包服务。中心可以向科研者提供完整的学术服务和论文写作、翻译指导,缩短科研项目、学术成果发表的周期。同时也开展了生命科学、医学科研文献翻译的工作。

硬件方面我们拥有:ABI7500荧光定量PCR仪、奥林巴斯荧光倒置显微镜、beckman多激光流式细胞仪等分子生物学、细胞生物学的实验仪器,可以开展绝大多数常规相关实验。

软实力方面中心拥有一批高素质的管理人才,海归博士和多所高校的学术顾问,拥有强大的专业知识背景,完善的营销队伍。

中心承接医学科研相关课题的领域广,可以承接大部分科室的基础医学或机制研究,包括肿瘤科、消化科、外科、泌尿外科、麻醉科、神经外科等。其中肿瘤类科研项目的科研实力尤为深厚。

细胞实验

微量元素检测

细胞培养

基因检测

蛋白检测

形态学实验

酶联免疫

腺病毒服务

凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)

  • 细胞粘附

    细胞粘附

    细胞粘附分子(cell adhesion molecules,CAMs) 是一类膜表面糖蛋白,它们以配体-受体特异性结合的方式介导细胞与细胞间、细胞与细胞外基质间的相互接触和结合并调节细胞功能,在胚胎发育和分化、正常组织结构的维持、炎症反应、免疫应答、凝血和血栓形成、创伤修复、肿瘤浸润与转移等许多生理和病理过程中发挥重要的生物学作用。  实验步骤:    1. 用10ug/ml的Fn预铺96孔板,70ul/孔,4℃过夜后,PBS洗3遍    2. 再用1% BSA于37℃封闭1h,PBS洗3遍    3. 待测细胞培养至对数生长期,消化细胞,用无血清培养基悬浮细胞,用血球计数板计数,调整浓度为5*105/ml    4. 分别接种于预铺Fn的96孔板中,每孔5000个细胞,每组设3个复孔。37 ℃孵育1 h后,PBS洗去未黏附的细胞    5. 5%戊二醛于4 ℃固定0.5 h,PBS 洗3遍;0.1%的结晶紫染色,室温静止0.5 h,PBS洗3 遍    6. 每孔加入100μl 10%的乙酸,5~10 min后用酶标仪检测595nm的吸光度值,用以表示黏附细胞的多少    7. 或者按照每孔加入100 ul甲醇,固定15min    8. 每孔加入100 ul吉姆萨染液,染色15min,PBS洗去染液    9. 倒置显微镜下随机取5个随机视野计数粘附细胞数量病拍照,统计结果服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期细胞粘附建议3重复询价5个工作日 温馨提醒:若用酶标仪计数为步骤1-6;若需要照片用步骤1-4,7-9 
  • 细胞增殖(MTT)

    细胞增殖(MTT)

    活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臜(Formazan)并沉积在细胞中,而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲臜,用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内,MTT结晶形成的量与细胞数成正比。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选、细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。它的特点是灵敏度高。   实验步骤:  1. 收集对数期细胞  2. 酶消化  3. 血球计数板计  4. 换液  5. 加MTT固定,孵育  6. 加DMSO,振荡  7. 测OD值  我们提供:     1. 实验报告,包括实验材料、方法、步骤和实验结果     2. 原始数据,包括OD值和折线图   结果示意图:    服务周期:  服务内容说明价格∕元实验周期MTT贴壁细胞询价3个工作日MTT悬浮细胞询价3个工作日   温馨提醒:  1. 需对数期细胞  2. 提供实验分组,试剂刺激细胞时间和使用浓度 
  • 细胞侵袭

    细胞侵袭

    Matrigel是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分,含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖,铺在无聚乙烯吡硌烷酮的聚碳酸酯滤膜上,能在DMEM培养基中重建形成膜结构,这种膜结构与天然基质膜结构极为相似。滤膜孔径一般为8μm,而且膜孔都被Matrigel覆盖,细胞不能自由穿过,必须分泌水解酶,并通过变形运动才能穿过这种铺有Martrigel的滤膜,这与体内情况较为相似。可通过这种模型来检测细胞的侵袭情况。通过体外模型来检测细胞的侵袭情况,主要应用于各种细胞因子对恶性肿瘤细胞侵袭和转移的影响及一些抑制血管生成的新药研究。实验步骤:  1. matrigel在4℃过夜融化  2. 稀释matrigel至终浓度1mg/ml  3. 在chamber上室底部中央垂直加入稀释后的matrigel。37℃温育4-5 h  4. 所有细胞培养试剂和Transwell chamber放在37℃恒温水浴箱温育  5. 消化培养至对数期的细胞,用无血清培养基悬浮细胞,计数,调整浓度为5*105/ml  6. 在下室加入含20%血清的培养基。上室加入细胞悬液,37 ℃、5%CO2、饱和湿度条件下继续培养24 h  7. 取出chamber,吸干上室液体,移到预先加入甲醇的孔中,室温固定30min  8. 取出chamber,吸干上室固定液,移到预先加入结晶紫染液的孔中,室温染色15-30min;用PBS冲洗浸泡数次,取chamber,先用干棉签将上室内液体吸去,再用棉签轻轻擦Matrigel凝胶和聚碳酯膜上表面的细胞  9. 揭下膜表面上的细胞,晾干,封片  10. 显微镜下计数,统计结果;(若不用保存底膜,可省去步骤9)结果示意图:                服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期细胞侵袭建议3重复1200/板3个工作日 温馨提醒:1. 提供105细胞2. 一块板共有24个小室,不足一块板按照一块板收费  
  • 细胞迁移

    细胞迁移

    将Transwell小室放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上室内盛装上层培养液,下室内盛装下层培养液,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。将细胞种在上室内,由于聚碳酸酯膜有通透性,下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞,从而可以研究下层培养液中的成分对细胞迁移运动等的影响。实验步骤:  1. 37℃温育细胞培养试剂和Transwell  2. 收集对数期细胞,悬浮细胞,计数  3. 下室加含血清培养液,上室加细胞悬液培养  4. 甲醇固定  5. 结晶紫染色  6. 中性树脂封片  7. 统计结果结果示意图:              服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期细胞迁移(Transwell法)建议3重复询价3个工作日温馨提醒:   1. 至少提供105细胞   2. 提供细胞相关信息
  • 透射电镜

    透射电镜

    利用电子射线(或称电子束)穿透样品,而后经多级电子放大后成像于荧光屏。透射率高,可以用来观察组织和细胞内部的超微结构以及微生物和生物大分子的全貌。能分辨0.1纳米以下的微细物质结构,放大倍数可达100万余倍。实验步骤:  1. 取材  2. 固定 (2.5%戊二醛)  3. 脱水          4. 包埋         5. 固化                        6. 超薄切片机切片 50-60 nm  7. 3%醋酸铀-枸橼酸铅双染色  8. 透射电镜扫描拍照我们提供:  1. 每个标本提供两张照片  2. 提供实验方法、步骤、所用试剂、仪器,实验结果将以电子或书面形式提交给您结果示意图:                        服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期透射电镜普通标本询价30个工作日 温馨提醒:  1. 确保细胞或组织取材新鲜,固定及时  2. 标本修成最大面宽度不超过2cm  3. 提供实验必要的信息,例如组织来源、实验目的和拍照要求
  • 扫描电镜

    扫描电镜

    在光学显微镜下小于0.2mm的一些细微结构,即便是再提高放大倍数也无法看清,这些结构称为亚显微结构或超微结构。要想看清这些结构,就必须选择波长更短的光源,以提高显微镜的分辨率。目前扫描电镜的分辨力为6~10nm,扫描电镜的最大有效放大倍率为0.2mm/10nm=20000X。样品制备简单,放大倍数大,分辨率高,场景深,图像立体感丰富,易于识别和解释,广泛应用于生物学和医学等领域。实验步骤:        1. 清洗:一般用pH7.2磷酸盐缓冲        2. 固定:常规法用2.5﹪戊二醛前固定24h(放入0-4℃冰箱中)即可。一些特殊样品,如幼嫩的、含水量高的样品最好还是用四氧化锇后固定2h        3. 脱水:乙醇系列30﹪-50﹪-70﹪-85﹪-95﹪-100﹪(2次)逐级脱水,每级10-15min,块大的应适当摇动,保证脱水干净        4. 中间液代换:分两步。第一步用醋酸(异)戊酯:乙醇=1:1的混合液浸泡10min,第二步用醋酸异戊酯浸泡10min,适当摇动        5. 临界点干燥:代换后的样品转入样品篮中,放进预冷的临界点干燥仪样品室内,盖好室盖后注入液体二氧化碳,以淹没样品为准,先升温至15℃加热10min,再升温至35℃让其气化,观察液体全气化后慢慢放气,必须待气放尽才能开盖取样        6. 粘贴样品:一般样品可用双面胶带粘贴,如果样品块大,导电性差,必须用导电胶粘贴        7. 镀膜后入镜观察我们提供:1. 每个样本提供两张照片2. 提供具体的实验方法、步骤、所用试剂、仪器,实验结果将以电子或书面形式提交给您结果示意图:  服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期扫描电镜提供2张照片询价30个工作日 温馨提醒:    1. 组织修成最大宽度不超过2cm大小    2. 提供组织相关信息,拍照要求,参考文献
  • 流式细胞周期

    流式细胞周期

    PI ,即碘化丙锭,可以与细胞内DNA 和RNA 结合,采用RNA酶将RNA消化后,通过流式细胞术检测到的与DNA 结合的PI 的荧光强度直接反映了细胞内DNA含量的多少。由于细胞周期各时相的DNA 含量不同,通常正常细胞的 G0/G1 期具有二倍体细胞的DNA 含量(2N) ,而G2/ M 期具有四倍体细胞的DNA 含量(4N) ,而S 期的DNA含量介于二倍体和四倍体之间。因此,通过流式细胞术PI染色法对细胞内DNA 含量进行检测时,可以将细胞周期各时相区分为 G0/G1 期,S 期和G2/ M期,并可通过特殊软件计算各时相的百分率。实验步骤:   1.  细胞铺板   2.  细胞同步化处理   3.  样品收集   4.  上机检测   5.  同步化数据分析结果示意图: 服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期流式细胞周期建议3重复询价5个工作日  温馨提示:1. 提供108细胞2. 提供细胞处理方案
  • 流式细胞检测

    流式细胞检测

    流式细胞检测技术是利用流式细胞仪,以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术。  实验步骤:  1. 用T25培养瓶培养各细胞株,代细胞生长达到80-90%融合后,弃掉旧培养液  2. 用2ml的PBS洗细胞两次后,加入胰酶消化细胞,显微镜下观察细胞变圆即可,加入4ml的完全培养液终止消化  3. 用移液器轻轻吹下细胞,将细胞混合液移入15ml离心管中,1000r/m离心10min,离心结束后,弃掉培养液上清,用5mlPBS 悬浮细胞沉淀,1000r/m离心10min  4. 弃上清后用500ul PBS悬浮细胞沉淀。之后分别加入抗体,4℃条件下孵育30min用流式细胞仪进行流式分析结果示意图:   服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期流式检测不包括试剂盒费用询价3个工作日 温馨提醒:1.  流式分选建议用直标抗体2.  提供105细胞 
  • 流式细胞分选

    流式细胞分选

    流式细胞分选技术是利用流式细胞分选仪,以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它可根据发射光的荧光强度和波长将发光颗粒亚群分开并可实现单克隆分选,对复杂样本中的细胞进行鉴定、分类、定量和分离,分选后的细胞能直接用于培养、移植、核酸提取、单细胞PCR扩增或原位杂交等。   实验步骤:  1. 用T25培养瓶培养各细胞株,代细胞生长达到80-90%融合后,弃掉旧培养液  2. 用2ml的PBS洗细胞两次后,加入胰酶消化细胞,显微镜下观察细胞变圆即可,加入4ml的完全培养液终止消化  3. 用移液器轻轻吹下细胞,将细胞混合液移入15ml离心管中,1000r/m离心10min,离心结束后,弃掉培养液上清,用5mlPBS 悬浮细胞沉淀,1000r/m离心10min  4. 弃上清后用500ul PBS悬浮细胞沉淀。之后分别加入抗体,4℃条件下孵育30min用流式分选细胞仪进行流式分析  结果示意图:  服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期流式分选不包括试剂盒费用询价3个工作日   温馨提醒:  1.  流式分选建议用直标抗体  2.  多通道筛选,需选用不同标记的一抗  3.  另外收取1200元开机费
  • 流式凋亡检测

    流式凋亡检测

    在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS) 由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V进行荧光素(EGFP、FITC)标记,以标记了的Annexin V作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。实验步骤:  1. 搜集细胞  2. 加入5μLAnnexin V-FITC,轻轻混  3. 室温避光孵育  4. 离心,加Annexin V-FITC重悬细胞  5. 加染色液,室温避光保存  6. 流式细胞仪检                  结果示意图:  服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期流式凋亡建议3重复询价3个工作日   温馨提醒:    至少提供108个细胞 
  • 微量元素检测

    微量元素检测

    在体内含量不足0.05%的种微量元素是人体所必需的有:Zn、Fe、Cu、Mn、Cr、Mo、Co、Se、Ni、V、Sn、N、I、Sr。它们在人体内的含量是平衡的。当人体所处的环境或饮食发生变化,这些微量元素含量的平衡状态也会随之变化。长期处于微量元素失衡的环境或长期使用微量元素失衡的食品,均会破坏人体的微量元素平衡。环境污染和不良的生活习惯,使有毒有害的微量元素在体内有蓄积的倾向,将严重威胁人体的健康。适时地检测人体内的微量元素含量,掌握体内微量元素的变化规律,以便有的放矢的缺什么,补什么,多什么,排什么,是保障人体健康的重要措施。通常用微量元素检测的样品有头发、血清、全血、尿、等。头发是采用枕部发根23cm的部位做样品,这些头发样品通常是反映2-4周内的微量元素总的平均值,不受某一天的饮食影响,比较全面地反映出这段时间的微量元素总体水平。但头发、指甲等样品在洗涤、消化等环节上容易引入误差。血清、全血等样品在测定时无需前处理,操作比较简单,因为血清、全血样品的微量元素含量随饮食的变化而变化,所以通过该样品所检测到的是实时结果。检测范围:头发:汞血清:锌、铜、钒、硒、铬、钴、镍、砷、铁、镁、铜、钙等全血:汞、铅、锌、铜、钒、硒、铬、钴、镍、砷、铁、镁、铜、钙等   尿:汞、铅、锌、铜、钒、硒、铬、钴、镍、砷、铁、镁、铜、钙等检测仪器: Thermo、Perkinelmer、Varian公司 原子吸收分光光度仪Thermo、 Agilent公司  电感耦合等离子体质谱仪 元素分类选择生物样本临床意义铝Al微量非必需血铝肾功能不良时血铝升高钙Ca宏量元素血钙不建议查,我们没有优势钒V微量非必需尿钒急性职业性暴露可考虑检测,但仅参考不诊断铬Cr微量必需血铬/尿铬常见于职业性暴露锰Mn微量必需24小时尿锰/尿锰/发锰常见于职业性暴露,24小时尿锰指标优,发锰为长期暴露铁Fe微量必需血清铁缺铁或铁中毒钴Co微量必需尿钴/血钴尿钴高,钴中毒/血钴低,维生素B12缺乏镍Ni微量非必需尿镍职业性镍中毒铜Cu微量必需血铜/24小时尿铜铜缺乏或威尔森氏病锌Zn微量必需血清锌锌缺乏或锌中毒砷As微量非必需24小时尿砷/尿砷/发砷常见于职业性暴露,24小时尿砷指标优,发锰为长期暴露硒Se微量必需血清硒硒缺乏镉Cd微量非必需尿镉/血镉尿镉慢性暴露/血镉急性暴露锑Sb微量非必需尿锑锑中毒钡Ba微量非必需血钡仅参考不诊断铊Tl微量非必需尿铊铊中毒铀U微量非必需24小时尿铀诊断铀损伤,连续收集2周,后减少收集次数 全血标本采血注意事项:抽血前实验技术人员必须用肥皂清洗干净双手。将被检者抽血处的皮肤用肥皂清洗干净并酒精消毒。实验技术人员必须保持手部清洁,避免接触管壁及管盖内部。抽血后拔下针头将针筒内血液注入抗凝管内。每次抽两管,每管0.5ml血,抽完后立即摇晃混匀,立即盖好管帽,反复摇匀。置4℃保存。收费:面议
  • 原代细胞培养

    原代细胞培养

    细胞培养是生物学和医学研究最常用的手段之一,可分为原代培养和传代培养两种。原代培养是直接从生物体获取细胞进行培养。由于细胞刚刚从活体组织分离出来,故更接近于生物体内的生活状态。这一方法可为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段,同时也为以后传代培养创造条件。利用此方法还可直接服务于临床实践。  实验步骤:     1. 试剂耗材准备   2. 取新鲜动物组织   3. 酶消化   4. 过滤网筛选、分离细胞   5. 加培养液,37℃、5%CO2培养   6. 传代   7. 冻存   8. 复苏  我们提供:  提供106冻存细胞  结果示意图:   服务周期: 服务内容说明价格∕元实验周期原代培养新鲜组织和方案询价15-30个工作日  温馨提醒:  提供新鲜组织标本
  • 细胞株培养

    细胞株培养

    细胞的体外培养技术,即将离体细胞在体外模拟体内环境,使之继续生存、生长、繁殖的一种方法。细胞培养技术是生物 技术中最核心、最基础的技术。 我们提供: 1. 培养状态良好的细胞用于后续实验 2. 将细胞冻存保存 3. 细胞培养的详细方法 结果示意图:   服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期细胞培养培养状态良好的细胞询价3-5个工作日 温馨提醒: 1. 冻存细胞或待培养细胞(或由我们代购) 2. 细胞培养条件及注意事项
  • 干细胞培养

    干细胞培养

     干细胞(stem cells, SC)是一类具有自我复制能力(self-renewing)的多潜能细胞,在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞(embryonic stem cell,ES细胞)和成体干细胞(somatic stem cell)。干细胞是一种未充分分化,尚不成熟的细胞,具有再生各种组织器官和人体的潜在功能,医学界称之为“万用细胞”。 我们提供:提供106冻存细胞和图片 结果示意图:  服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期干细胞培养培养方案询价15-30个工作日  温馨提醒:      提供新鲜组织标本和实验方法 
  • 原位杂交

    原位杂交

    利用核酸分子单链之间有互补的碱基序列,将有放射性或非放射性的外源核酸(即探针)与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对,结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。 用同位素标记的放射性探针优势在于对制备样品的要求不高,可以通过延长曝光时间加强信号强度,比较灵敏。    实验步骤:   我们提供:   1. 提供完成实验的玻片或者标本   2. 每张切片提供两张照片   3. 提供具体的实验方法、步骤、所用试剂、仪器、及相关分析数据等,实验结果将以电子或书面形式提交给您   结果示意图:     服务周期: 服务内容说明价格∕元实验周期原位杂交按照每个标本或者每张切片收费询价7个工作日    温馨提醒:   1. 客户提供标准探针和目的探针   2. 确保细胞或组织取材新鲜,固定及时   3. 取材大小和固定方法正确   4. 提供实验必要的信息,例如组织来源、探针类型和拍照要求   5. 以上步骤为钰森使用步骤,客户可以提供实验方案和步骤
  • 定点突变

    定点突变

    通过聚合酶链式反应(PCR)等方法向目的DNA片段(可以是基因组,也可以是质粒)中引入所需变化(通常是表征有利方向的变化),包括碱基的添加、删除、点突变等。定点突变能迅速、高效的提高DNA所表达的目的蛋白的性状及表征,是基因研究工作中一种非常有用的手段。 实验步骤: 我们提供:  1. 实验操作过程,突变用引物序列  2. 冻干后的测序质粒及含有改质粒的穿刺菌保  3. 详细实验报告,包括突变基因测序报告  服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期点突变标本干冰运输 询价3个工作日 温馨提醒: 1. 含有待突变基因的高纯度质粒,不少于5ug,电泳图清晰,达到酶切及测序要求 2. 待突变基因原始序列文件及原始测序图片文件、突变目标序列及详细信息、基因两端酶切位点,并提供待变基因的生物 特性,如是否影响细菌增殖等特性 3. 相关载体大小、抗性及图谱等信息;若需要克隆至目的载体,请提供目的载体及其详细信息
  • 单核苷酸多态性(SNP)

    单核苷酸多态性(SNP)

    单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms,SNP)是指基因组上单个核苷酸的变异,人类基因组平均每1000个就有一个SNP。它是由基因组DNA某一特定核苷酸位置上单个碱基的转换、颠换、插入或缺失引起的点突变,使得群体之间和个体之间产生了差异。其中转换和颠换发生频率较高,转换是指同型碱基之间的转换,即嘌呤与嘌呤、嘧啶与嘧啶间;颠换是指发生在嘌呤与嘧啶之间的替换。事实上转换的发生频率占多数,且CG序列上出现的SNP最为频繁,而且多是C转换为T,原因是CG中的C常因为甲基化自发地脱氨基后即成为胸腺嘧啶。  实验步骤:       1. DNA抽提       2. PCR扩增目的片段        3. 在T1型PCR仪上运行程序       4. PCR产物测序        5. 数据分析   服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期SNP检测方法 询价 3个工作日  我们提供:    1. 根据客户的具体情况,提供不同的方法检测SNP,如测序法、HRM法、探针法、质谱法等,保证经济、高效地达到客户    的实验目的    2. 原始电泳图谱、仪器相关文件等原始数据和初步的分析结果  温馨提示:        客户方提供样品的种属、类型、数量、需要检测的基因位点等详细信息  
  • RT-PCR 实验

    RT-PCR 实验

    逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription PCR,RT-PCR),是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA,再以cDNA为模板,利用变性,退火和延伸多步骤、多循环来扩增目的DNA片段。在该反应过程中,目的DNA产量呈指数增长,使一些极为微量RNA样品检测成为可能。  实验步骤:     1. 样品获取、处理和制备              1.1 悬浮细胞:将悬浮细胞1×106 个/mL培养液倒入离心管中,离心沉淀细胞。PBS冲洗2次,将细胞离心底部,向离心管中加入500-1000μl Trizol,然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。              1.2 贴壁细胞:用胰酶消化细胞1×106个/mL,离心PBS冲洗2次,将细胞离心底部,向离心管中加入500-1000μl Trizol, 然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。              1.3 组织:采集新鲜组织100mg,放入离心管中,做好标记,于液氮冷冻片刻后,置于-80度冰箱保存。              1.4 血液:用抗凝管收集的全血1mL,加入RNA保护剂,做好标记,置于-80度冰箱保存。    2. RNA或DNA质控    3. 反转录    4. PCR扩增    5. 琼脂糖凝胶电泳  我们提供:  1. 抽取的RNA和电泳图及逆转录的cDNA样本  2. 操作步骤及详细的试剂和耗材  3. 引物序列  4. 琼脂糖电泳图  5. 原始数据及处理后的正式实验数据  结果示意图:   服务周期: 服务内容说明价格实验周期RT-PCR提供目的基因片段120元/基因/样7个工作日   温馨提醒:      1.  细胞样本106以上,收集后-80度保存;组织标本100mg标本;血清或血液1mL以上,干冰运输      2.  单基因10个样本以上      3.  试验周期不包括探针、标准品合成时间      4.  公司默认的抽提方式TRIZOL,如果需要试剂盒抽提,则需要客户提供      5.  标本公司免费保存一个月,一个月以后自行处理,如果需要邮寄,则需要客户付邮寄费用。
  • Realtime PCR 实验

    Realtime PCR 实验

    实时荧光定量PCR技术是在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该技术不仅实现了对DNA模板的定量而且具有灵敏度高、特异性和可靠性更强、能实现多重反应、自动化程度高、无污染性、具实时性和准确性等特点。实验步骤:     1. 样品获取、处理和制备         1.1 悬浮细胞:将悬浮细胞1×106 个/mL培养液倒入离心管中,离心沉淀细胞。PBS冲洗2次,将细胞离心底部,向离心管中加入500-1000μl Trizol,然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。         1.2 贴壁细胞:用胰酶消化细胞1×106个/mL,离心PBS冲洗2次,将细胞离心底部,向离心管中加入500-1000μl Trizol,然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。         1.3 组织:采集新鲜组织100mg,放入离心管中,做好标记,于液氮冷冻片刻后,置于-80度冰箱保存。         1.4 血液:用抗凝管收集的全血1mL,加入RNA保护剂,做好标记,置于-80度冰箱保存。    2. RNA或DNA质控    3. 反转录    4. 引物验证    5. qPCR过程    6. 数据分析  我们提供:  1. 抽取的RNA和电泳图及逆转录的cDNA样本  2. 操作步骤及详细的试剂和耗材  3. 引物序列  4. 溶解曲线和扩增曲线  5. 原始数据及处理后的正式实验数据   实验器材:    结果示意图:      服务周期:服务内容说明价格实验周期RealtimePCR相对定量-染料法170元∕基因∕样本7个工作日相对定量-探针法190元∕基因∕样本7个工作日绝对定量-染料法220元∕基因∕样本7个工作日绝对定量-探针法220元∕基因∕样本7个工作日miRNA-RealtimePCR提供试剂盒280元∕基因∕样本10个工作日不提供试剂盒650元∕基因∕样本10个工作日探针合成询价   温馨提醒:      1. 细胞样本106以上,收集后-80度保存;组织标本100mg标本;血清或血液1mL以上,干冰运输      2.  单基因10个样本以上      3.  试验周期不包括探针、标准品合成时间      4.  公司默认的抽提方式TRIZOL,如果需要试剂盒抽提,则需要客户提供 
  • DNA甲基化检测

    DNA甲基化检测

    DNA甲基化是最早发现的基因表观修饰方式之一,真核生物中的甲基化仅发生于胞嘧啶,即在DNA甲基化转移酶(DNMTs)的作用下使CpG二核苷酸5’-端的胞嘧啶转变为5’-甲基胞嘧啶。DNA甲基化通常抑制基因表达,去甲基化则诱导了基因的重新活化和表达。这种DNA修饰方在不改变基因序列前提下实现对基因表达的调控。实验步骤:1. 总DNA提取2. 片段化3. 连接3’/5’接头4. 甲基化修饰5. PCR扩增6. 文库定量7. 上机测序8. 数据质检9. 甲基化分布分析10. 甲基化区域注释/基因注释我们提供:   1. 完整实验报告、电泳图谱、测序图谱、序列比对图谱   2. 初步分析数据等结果示意图: 服务项目:服务内容说明价格实验周期甲基化特异性的PCR(MSP)引物合成费用另算1400/样30个工作日亚硫酸氢盐测序(BSP)引物合成费用另算1400/样30个工作日特别提醒     细胞(≥106 个)、组织(≥300mg)、血液(≥1ml)、血清(≥1.5ml)等样品材料,基因组DNA(体积≥20μl,浓度≥50 ng/μl)特别提醒:
  • ChIP检测

    ChIP检测

    染色质免疫沉淀技术(ChromatinImmunoprecipitation,简称ChIP )是研究体内蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体反应的特异性,可以真实地反映体内蛋白因子与基因组DNA结合的状况。染色质免疫沉淀技术的原理是:  在生理状态下把细胞内的DNA与蛋白质交联在一起,通过超声或酶处理将染色质切为小片段后,利用抗原抗体的特异性识别反应,将与目的蛋白相结合的DNA片段沉淀下来。染色质免疫沉淀技术一般包括细胞固定,染色质断裂,染色质免疫沉淀,交联反应的逆转,DNA的纯化,以及DNA的鉴定。因为ChIP实验涉及的步骤多,结果的重复性较低,所以对ChIP实验过程的每一步都应设计相应的对照,而且对结果的分析也需要有一定的经验实验步骤:    1. 交联    2. 解交联    3. 超声波打碎    4. 免疫沉淀    5. 洗涤    6. DNA纯化我们提供:   1. 实验报告,包括实验材料、方法、步骤和实验结果   2. 原始数据(包括电泳图)结果示意图: 服务周期:服务内容说明价格/元实验周期Chip客户提供一抗3800/样20温馨提醒:客户提供抗体和样本来源等详细信息
  • PCR

    PCR

    聚合酶链反应(PCR),是以cDNA为模板,利用变性,退火和延伸多步骤、多循环来扩增目的DNA片段。在该反应过程中,目的DNA产量呈指数增长,使一些极为微量DNA样品检测成为可能。具有反应特异性强,灵敏度高,简单快捷,对样品纯度要求低等特点。  实验步骤:    1. 样品获取、处理和制备        1.1 悬浮细胞:将悬浮细胞1×106 个/mL培养液倒入离心管中,离心沉淀细胞。PBS冲洗2次,将细胞离心底部,向离心管中加入500-1000μl Trizol,然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。     1.2 贴壁细胞:用胰酶消化细胞1×106个/mL,离心PBS冲洗2次,将细胞离心底部,向离心管中加入500-1000μl Trizol,然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。     1.3 组织:采集新鲜组织100mg,放入离心管中,做好标记,于液氮冷冻片刻后,置于-80度冰箱保存。     1.4 血液:用抗凝管收集的全血1mL,加入RNA保护剂,做好标记,置于-80度冰箱保存。   2. DNA质控    3. PCR扩增   4. 琼脂糖凝胶电泳  我们提供:  1. 抽取的DNA和电泳图  2. 操作步骤及详细的试剂和耗材  3. 引物序列  4. 琼脂糖电泳图  5. 原始数据及处理后的正式实验数据  结果示意图:    服务周期: 服务内容说明价格∕元实验周期DNA抽提抽提方法 40元∕标本5个工作日PCR目的片段 60元∕反应7个工作日  温馨提醒:         细胞样本106以上,收集后-80度保存;组织标本100mg标本;血清或血液1mL以上,干冰运输 
  • 质谱分析

    质谱分析

    蛋白质谱鉴定是蛋白质组学研究的核心技术之一,根据其检索方式的不同又分为肽指纹图谱检索(Peptide Mass Fingerprint,PMF)、序列检索(Sequence Query)以及串联质谱离子检索(MS/MS Ion Search)等鉴定方法。其中串联质谱离子检索已逐渐取代肽指纹图谱检索,成为目前最常用的质谱鉴定方式,其丰富的肽段碎片质谱信息使得即使对于混合蛋白以及大数据库检索也能获得很可靠的结果。 我们提供:     1. 所用仪器、耗材、参数及操作过程     2. 一级质谱:质谱图、肽段分子量、数据库检索结果     3. 二级质谱:质谱图、肽段分子量、数据库检索结果、肽段氨基酸序列、修饰位点等   结果示意图:                                  服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期质谱分析提供质谱要求7003个工作日 特别提醒: 送样须知  A:样品量:50pmol干粉或1ug/uL以上(一般测试)、100pmol干粉或1ug/uL以上(MALDI串联质谱分析)、100ug干粉以上(二硫键分析、糖基化分析,磷酸化分析,  其他修饰分析)、10ug干粉以上(SDS-PAGE或IEF)  B:盐含量:挥发性无机盐,20mM,请勿使用PBS、SDS和尿素等质谱干扰物质  C:考马斯亮蓝染色样品可全部接收,银染过程中不得使用戊二醛作为固定剂  D:请告知样品是否有修饰,并请注明修饰方式
  • 免疫共沉淀(CO-IP)

    免疫共沉淀(CO-IP)

    免疫共沉淀(coimmunoprecipitation)是一种在体外探测两个蛋白分子间是否存在特异性相互作用的一种方法。其原理是如果两个蛋白在体外体系能够发生特异性相互作用的话,那么当用一种蛋白的抗体进行免疫沉淀时,另一个蛋白也会被同时沉淀下来。与酵母双杂交技术不同,免疫共沉淀技术所利用的是抗原和抗体间的免疫反应,是一种基于体外非细胞的环境中研究蛋白质与蛋白质的相互作用的方法。 相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的,处于天然状态;蛋白的相互作用是在自然状态下进行的,可以避免人为的影响;可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。  实验步骤:   1. 在细胞裂解液中孵育抗体   2. 将样品加入蛋白A/G琼脂糖树脂   3. 通过离心去除未结合蛋白   4. 洗脱结合蛋白   5. Westernblot检测或质谱分析   我们提供:   1. 提供具体的实验方法、步骤、所用试剂、仪器、及相关分析数据等,实验结果将以电子或书面形式提交给您   2. 详细的实验报告、蛋白浓度,实验显色照片及胶     结果示意图:   服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期CO-IP提供一抗550015-20工作日   温馨提醒:       客户提供组织或细胞样本,抗体(或由我们代购)  
  • 蛋白质双向电泳(2D)

    蛋白质双向电泳(2D)

           蛋白质双向电泳是将蛋白质等电点和分子量两种特性结合起来进行蛋白质分离的技术。蛋白质的双向电泳的第一向为等电聚焦(Isoelectrofocusing, IEF),根据蛋白质的等电点不同进行分离;第二向为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),按亚基分子量大小进行分离。经过电荷和分子量两次分离后,可以得到蛋白质分子的等电点和分子量信息。因而具有较高的分辨率和灵敏度,已成为蛋白质特别是复杂体系中的蛋白质检测和分析的一种强有力的生化手段。实验步骤:    1.样品的制备,冻存冻存于-80℃    2.蛋白定量测定    3.等点聚焦 - 第一向电泳    4.SDS-PAGE电泳第二向电泳  我们提供:     1.  实验的试剂耗材、仪器设备、操作过程一份     2.  蛋白定量信息一份     3.  实验结果凝胶扫描图片     4.  Image Master软件分析报告  结果示意图:  服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期2D电泳标本-80℃保存和运输4800元∕样25-30个工作日  特别提醒:      标本-80℃保存和干冰或液氮运输;      软件分析报告费用另计。
  • WB技术服务

    WB技术服务

          Western Blotting即蛋白质印迹,是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达信息,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。 技术路线:     结果示意图:  实验结束后,我们将向您提供:1. 剩余的样品和抗体2. 实验报告3. 原始条带和柱状图   服务周期:服务内容说明价格实验周期 Western-Blot总蛋白1200元/膜7个工作日膜蛋白1200-1700元/膜(膜蛋白抽提50元/样品)7个工作日核蛋白1200-1700元/膜(膜蛋白抽提50元/样品)7个工作日   温馨提示:     1. 细胞样品106个以上,收集干细胞后放-80℃冰箱或液氮保存     2. 组织样品100mg以上, -80℃冰箱或液氮保存     3. 一抗、核(膜)蛋白抽提试剂盒需客户提供     4. 内参免费(一般选用GAPDH内参)
  • 组织芯片

    组织芯片

    组织芯片又称组织微阵列,就是将数十至上千个小组织整齐排放在一张载玻片上而制成的组织切片。由于组织芯片制成的切片体积小,减少了人为筛选的无效组织,降低实验耗材成本,而且一次性实验即可获得大量结果,提高实验效率。组织芯片可用于组织中的DNA、RNA和蛋白质的定位分析和检测,如HE染色、免疫组织化学染色、DNA和RNA原位杂交、荧光原位杂交等。组织芯片克服传统病理学方法只能逐个研究切片的方式,可在一张切片上高通量获得组织形态学、基因和蛋白表达的信息。同时,避免了不同实验条件产生的结果误差,具有更强的可比性。   实验步骤:  1. 组织芯片的设计   2. 对目标蜡块组织的HE切片作形态学观察   3. 分别在目标组织切片和相应石蜡组织块上相应位置进行标记   4. 用阵列蜡块作5μm组织切片,经10%APES的丙酮溶液处理的载玻片   5. 烤片,37℃过夜,室温保存备用   我们提供:  1. 提供组织芯片包埋块   2. 提供组织芯片切片   3. 提供具体的实验方法、步骤、所用试剂、仪器、及相关分析数据等,实验结果将以电子或书面形式提交给您   结果示意图:                    服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期组织芯片提供腊块询价10个工作日  温馨提醒: 1. 提供石蜡包埋的组织、附带一张HE染色切片  2. 提供实验必要的试剂和信息,例如组织来源和主要部位。 
  • 特殊染色

    特殊染色

     1. 油红O、苏丹III、苏丹IV、苏丹黑染色 脂类染色,用于证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。2. Schiff氏法、AB/PAS染色法 糖原及粘液染色,用于某些血液病的诊断、鉴别诊断及疗效的观察3. 甲苯胺蓝染色 用于尖锐湿疣的初筛及肥大细胞的检测4. LFB染色 用于观察神经髓鞘和脊髓束变化等结果示意图:                  服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期油红O、苏丹III、苏丹IV、苏丹黑染色客户提供染液询价3个工作日Schiff氏法、AB/PAS染色法客户提供染液询价3个工作日甲苯胺蓝染色客户提供染液询价3个工作日LFB染色客户提供染液询价3个工作日   温馨提示:  1. 以上染色为常见染色,如果需要做其他染色可以电话咨询  2. 以上染色需要客户提供染料
  • 免疫荧光

    免疫荧光

    抗原抗体反应,其具有高度的特异性。先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量。实验步骤:   1. 固定   2. 清除内源性过氧化物酶   3. PBS洗   4. 封闭   5. 孵育一抗   6. PBS洗   7. 孵育二抗   8. PBS洗   9. DAPI复染   10. 封片   11. 荧光显微镜观察我们提供:  1. 提供完成实验的玻片  2. 每张切片提供一张200倍照片  3. 提供具体的实验方法、步骤、所用试剂、仪器、及相关分析数据等,实验结果将以电子或书面形式提交给您  4. 免费提供荧光二抗结果示意图:                    服务周期:                                                                              服务内容说明价格∕元实验周期IF单染建议做3张重复询价5个工作日IF双染建议做3张重复询价5个工作日IF三染建议做3张重复询价7个工作日Confocol拍照拍照倍数询价3个工作日 温馨提醒:1. 确保细胞或组织取材新鲜,固定及时2. 取材大小和固定方法正确,包埋面要求写清楚3. 提供实验必要的信息,例如组织来源、一抗来源和拍照要求   
  • 激光共聚焦(Confocal)

    激光共聚焦(Confocal)

    共聚焦显微技术(Confocal microscopy)是通过激光扫描共聚焦显微镜来获取细胞内某个薄层面上的荧光信息, 并结合计算机自动控制和信息收集功能,对荧光信号的分布、强度和动态变化进行全方位的分析和整合, 从而得到丰富的细胞信息。   1. 消除了聚焦平面以外的荧光信号的干扰, 故成像清晰   2. 可以对样品不同层面进行连续逐层扫描, 再由计算机将这些图形重组为三维图像,图形清晰度高、层次分明、立体感更强   3. 可对细胞某个选定结构进行长度和体积的测量, 在分析细胞空间结构和某些物质的胞内精确定位方面具有明显的优势   4. 可同时实现多重指标的检测。目前,该技术应用范围已扩展到细胞学、微生物学、发育生物学、遗传学激光共聚焦显微镜的应用:   1. 细胞生物学:细胞结构、细胞骨架、细胞膜结构、流动性、受体、细胞器结构和分布变化、细胞凋亡等   2. 生物学、免疫学、环境科学和营养学:免疫荧光标记(单标、双标或三标)的定位,细胞膜受体或抗原的分布,微丝 微管的分布、两种或三种蛋白的共存与共定位、蛋白与细胞器的共定位等。   我公司的技术强项在于研究蛋白之间的共定位以及蛋白和细胞器的共定位服务流程:   1. 构建质粒   2. 共转细胞   3. 免疫荧光   4. 激光扫描共聚焦显微镜扫描我们提供:   1. 提供多种带flag(包括荧光蛋白)的质粒:myc, HA, n-flag, GFP等   2. 提供构建好的载体质粒,并附上测序结果   3. 提供共定位图片   4. 提供具体实验方法、步骤、所用试剂、仪器、及相关分析数据等,实验结果将以电子或书面形式提交给您结果示意图: 服务周期:服务内容价位周期说明单色标记询价10个工作日包含DAPI染核双色标记询价询价三色标记询价询价 客户提供:   1. 提供已构建好的目的基因表达质粒(提供测序图谱)或基因的名称、序列   2. 提供细胞系和细胞培养的详细步骤   3. 提供抗体或细胞器的特异性Marker
  • 石蜡包埋及切片

    石蜡包埋及切片

    其基本原理用固定剂石蜡固定组织、细胞以及各种亚细胞器,保持组织微细结构,制成薄片,并用不同的染色方法增加各部分色差,在显微镜下观察组织、细胞的形态结构,或利用化学或物理方法显示组织、细胞内的某些化学成分,并可进行形态和化学成分的定量分析实验步骤:                          我们提供:   1. 提供蜡块和标签   2. 切片服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期石蜡包埋普通组织,特殊组织询价询价3个工作日切片3-5μm询价3个工作日 温馨提示:  1. 确保细胞或组织取材新鲜,固定及时  2. 取材大小和固定方法正确,包埋面要求写清楚  3. 提供实验必要的信息,例如组织来源,切片厚度  4. 我们普通包埋是用全自动包埋仪包埋,如有特殊要求请在签单之前说明,费用另算
  • Tunel(凋亡)

    Tunel(凋亡)

    TUNEL是分子生物学与形态学相结合的一种研究方法。细胞凋亡过程中,染色体DNA发生双链断裂或单链断裂,从而产生大量带有游离3'末端的DNA片段。脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)可以将荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸化酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而对凋亡细胞或凋亡小体进行原位染色,检测细胞凋亡。TUNEL法是在细胞和组织层次上进行生物学反应,结果直观,便于观察;可检测出极少量的凋亡细胞,灵敏度远比一般的组织化学和生物化学测定法要高。 实验步骤:   1. 充分脱蜡和水化   2. 3%过氧化氢甲醇中浸洗10min,抑制内源性过氧化氢酶   3. 用蛋白酶K(20μg/ml溶于Tris/HCl中,pH7.4~8.0)室温孵育15min   4. PBS洗2次,每次5min,擦干样品周围的水   5. 此阶段配制TUNEL反应混合物——从试剂2中取出100μl标记溶液作为两个阴性对照;将试剂1中取5μl+试剂2中45μl标记液中,配成50μl TUNEL反应混合物混匀(即配即用,4℃避光)   6. 标记反应:滴加50μl的TUNEL反应混合液,在湿盒中37℃孵育60min。PBS洗3次,每次5min,至此样品可在荧光显微镜下(绿色)分析结果   7. 信号转化和分析:擦干样品周围的水分,加入50ul转化剂-POD,湿盒中37℃孵育30min。PBS洗5min*5次   8. 加入50~100μl DAB底物溶液,室温(10~25℃)孵育5 min,PBS洗5min*3次   9. 中性树胶或者甘油封片(在封片前可以复染),光镜下分析结果我们提供:   1. 提供完成实验的玻片   2. 提供具体的实验方法、步骤、所用试剂、仪器、及相关分析数据等,实验结果将以电子或书面形式提交给您结果示意图:                         服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期Tunel凋亡提供白片询价3个工作日 温馨提醒:   1. 提供新鲜的组织、固定过的组织、石蜡包埋的组织、细胞爬片、石蜡切片、冰冻切片   2. 提供具体的拍照部位 
  • Masson染色

    Masson染色

    Masson染色法是利用两种或三种阴离子染料混合或先或后作用完整鉴别染色的。胶原纤维呈蓝色,肌纤维呈红色。实验步骤:       1. 组织固定,切片,脱蜡至水        2. Masson复合染色液5分钟        3. 0.2%醋酸水溶液稍洗        4. 5%磷钨酸5~10分钟        5. 0.2%醋酸水溶液浸洗2次        6. 亮绿染色液5分钟,0.2%醋酸水溶液洗2次        7. 无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封片结果为胶原纤维呈绿色,肌纤维呈红色,红细胞呈橘红色 我们提供:  1. 提供完成实验的玻片  2. 每张切片提供一张照片  3. 提供具体的实验方法、步骤、所用试剂、仪器、及相关分析数据等,实验结果将以电子或书面形式提交给您结果示意图:  服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期Masson染色提供白片询价3个工作日 温馨提示:1. 确保细胞或组织取材新鲜,固定及时2. 取材大小和固定方法正确,包埋面要求写清楚3. 提供实验必要的信息,例如组织来源 
  • 免疫组化(IHC)

    免疫组化(IHC)

    免疫组织化学(Immunohistochemistry)是一项以免疫学的抗原-抗体反应为理论基础,应用理化方法显示细胞结构的物质成分,进而分析研究细胞和组织的代谢、功能及其形态变化的实验技术。该方法将抗原-抗体反应的特异性与酶的高效催化作用有效结合起来,即用酶标记抗体,以酶与底物的显色反应对抗原进行示踪,并对呈色反应后的免疫阳性产物做半定量分析。操作步骤:1. 脱蜡2. 水化3. 除去内源性的过氧化氢酶4. 抗原修复5. 血清封闭6. 加一抗7. 加二抗8. 加DAB显色剂9. 苏木素复染10. 脱水透明11. 封片我们提供:1. 提供完成实验的玻片2. 每张切片提供三张合适视野的照片3. 提供具体的实验方法、步骤、所用试剂、仪器、及相关分析数据等,实验结果将以电子或书面形式提交给您结果示意图: 服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期IHC染色建议3重复询价4个工作日 特别提醒:1. 确保细胞或组织取材新鲜,固定及时2. 提供实验必要的信息,例如组织来源、实验目的和拍照要求
  • HE染色

    HE染色

    苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学科研中最基本,使用最广泛的一种染色方法。主要用于观察组织的形态与结构。实验步骤:            我们提供:       1. 提供完成实验的玻片       2. 每张切片提供两张照片       3. 提供具体的实验方法、步骤、所用试剂、仪器、及相关分析数据等,实验结果将以电子或书面形式提交给您 结果示意图:               服务周期:服务内容说明价格∕元实验周期HE染色提供白片询价3个工作日  温馨提醒:  1. 确保细胞或组织取材新鲜,固定及时  2. 取材大小和固定方法正确,包埋面要求写清楚  3. 提供实验必要的信息,例如组织来源、实验目的和拍照要求 
  • ELISA检测

    ELISA检测

    即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。具有快速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。  实验步骤:   1. 取出酶标板,依照次序对应分别加入100μl的标准品于空白微孔中   2. 分别标记样品编号,加入100μl样品于空白微孔中   3. 在标准品孔和样品孔中加入50μl的酶标记溶液   4. 36±2 ℃孵育反应 60分钟   5. 洗板机清洗5次,每次静置10-20秒   6. 每孔加入底物A、B液各50μl   7. 36±2℃下避光孵育反应15分钟   8. 每孔加入50μl终止液,终止反应   9. 在450nm波长处测定各孔的OD值  我们提供:  提供具体的实验方法、步骤、所用试剂、仪器、及相关分析数据等,实验结果将以电子或书面形式提交给您  结果示意图:                   服务周期:服务项目时间(工作日)费用(元/每试剂盒)  ELISA检测(试剂盒自备)血清1询价普通组织(肌肉,肝,肺等)1-2询价特殊组织(骨,软骨,牙齿等硬组织)1-2询价  ELISA检测(试剂盒在我们公司购买)血清1询价普通组织(肌肉,肝,肺等)1-2询价特殊组织(骨,软骨,牙齿等硬组织)1-2询价 特别提醒:         样本-20℃或-80℃保存和运输。 
  • 腺病毒服务

    腺病毒服务

    服务简介腺病毒是一种无包膜的球型结构的病毒,遗传物质为线型双股DNA形式。腺病毒的特点:(1)感染范围广对人致病性低;(2)对增殖和非增殖细胞均具有感染性;(3)能有效进行增殖;(4)病毒滴度高;(5)不整合到染色体中,无插入致突变性;(6)外源基因装载容量大。由于腺病毒的这些特点使其广泛地应用于体外基因转导、体内接种疫苗、和基因治疗等各个领域。技术特点※复制缺陷型腺病毒颗粒,对分裂期和非分裂期细胞均有感染作用;※无需任何转染试剂,操作简单;※适用于在难转染的细胞中进行RNA干扰、过表达特定基因或过表达特定microRNA研究和In vivo 实验;※不适用于感染腺病毒以后细胞发生死亡和分化的敏感细胞和需要长期稳定表达目的基因的实验。腺病毒包装示意图生产流程服务说明1.       客户提供目的基因信息或模板(或干扰序列),如果提供模板,需提供详细的质粒信息。2.       目的基因序列最好不要超过5kd,插入基因片段越大,滴度越低。
  • 凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)

    凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA)

    实验方法原理凝胶迁移或电泳迁移率实验(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一种研究DNA结合蛋白和其相关的DNA结合序列相互作用的技术,可用于定性和定量分析。这一技术最初用于研究DNA结合蛋白,目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。通常将纯化的蛋白和细胞粗提液和32P同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,在非变性的聚丙烯凝胶电泳上,分离复合物和非结合的探针。DNA-复合物或RNA-复合物比非结合的探针移动得慢。同位素标记的探针依研究的结合蛋白的不同,可是双链或者是单链。当检测 如转录调控因子一类的DNA结合蛋白,可用纯化蛋白,部分纯化蛋白,或核细胞抽提液。在检测RNA结合蛋白时,依据目的RNA结合蛋白的位置,可用纯化或部分纯化的蛋白,也可用核或胞质细胞抽提液。竞争实验中采用含蛋白结合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特异), 和其它非相关的片段(非特异),来确定DNA或RNA结合蛋白的特异性。在竞争的特异和非特异片段的存在下,依据复合物的特点和强度来确定特异结合。实验材料DNA样品试剂、试剂盒[γ-32P]ATPT4多聚核苷酸激酶Nuclease-Free WaterT4多聚核苷酸激酶缓冲液醋酸铵TE无水乙醇TBE buffer重蒸水甲叉双丙烯酰胺丙烯酰胺甘油过硫酸铵TEMED(四甲基乙二胺)EMSA Gel-Shift结合缓冲液溴酚蓝仪器、耗材水浴锅PCR仪离心机电泳仪电泳槽实验步骤一、探针的标记 1.   如下设置探针标记的反应体系: (1)待标记探针 (1.75 pmol/微升) :2微升。 (2)T4 Polynucleotide Kinase Buffer (10X) :1微升。 (3)Nuclease-Free Water :5微升。 (4)[γ-32P]ATP(3 000 Ci/mmol at 10 mCi/ml) :1微升。 (5)T4 Polynucleotide Kinase (5-10 u/微升) :1微升。 (6)总体积 10微升 (7)按照上述反应体系依次加入各种试剂,加入同位素后,Vortex混匀,再加入T4 Polynucleotide Kinase,混匀。 2.   使用水浴或PCR仪,37℃反应10分钟。 3.   加入1微升探针标记终止液,混匀,终止探针标记反应。 4.   再加入89微升TE,混匀。此时可以取少量探针用于检测标记的效率。通常标记的效率在30%以上,即总放射性的30%以上标 记到了探针上。为实验简便起见,通常不必测定探针的标记效率。 5.  标记好的探针最好立即使用,最长使用时间一般不宜超过3天。标记好的探针可以保存在-20℃。 二、 探针的纯化 通常为实验简便起见,可以不必纯化标记好的探针。在有些时候,纯化后的探针会改善EMSA的电泳结果。如需纯化,可以按照如 下步骤操作: 1.  对于100微升标记好的探针,加入1/4体积即25微升的5 M醋酸铵,再加入2体积即200微升的无水乙醇,混匀。 2.   在-70℃至-80℃沉淀1小时,或在-20℃沉淀过夜。 3.  在4℃,12 000 g-16 000 g离心30分钟。小心去除上清,切不可触及沉。 4.   在4℃,12 000 g-16 000 g离心1分钟。小心吸去残余液体。微晾干沉淀,但不宜过分干燥。 5.   加入100微升TE,完全溶解沉淀。标记好的探针最好立即使用,最长使用时间一般不宜超过3天。标记好的探针可以保存在 -20℃。 三、EMSA 胶的配制 1.   准备好倒胶的模具。可以使用常规的灌制蛋白电泳胶的模具,或其它适当的模具。最好选择可以灌制较薄胶的模具,以便于干胶等后续操作。为得到更好的结果,可以选择可灌制较大 EMSA 胶的模具。 2.   按照如下配方配制20毫升4%的聚丙烯酰胺凝胶(注意:使用29:1等不同比例的Acr/Bis对结果影响不大)。 (1)TBE buffer (10X): 1毫升。 重蒸水 16.2毫升。 (2)39:1 acrylamide/bisacrylamide (40%,w/v): 2毫升。 (3)80% 甘油: 625微升。 (4)10% 过硫酸铵 (ammonium persulfate) :150微升。 (5)TEMED :10微升 3.  按照上述次序加入各个溶液,加入TEMED前先混匀,加入TEMED后立即混匀,并马上加入到制胶的模具中。避免产生气泡, 并加上梳齿。如果发现非常容易形成气泡,可以把一块制胶的玻璃板进行硅烷化处理。 四、EMSA结合反应 1.   如下设置EMSA结合反应 阴性对照反应: (1)Nuclease-Free Water :7微升。 (2)EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X) :2微升。 (3)细胞核蛋白或纯化的转录因子: 0微升。 (4)标记好的探针 :1微升。 (5)总体积 :10微升。 样品反应: (1)Nuclease-Free Water :5微升。 (2)EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X) :2微升。 (3)细胞核蛋白或纯化的转录因子 :2微升。 (4)标记好的探针: 1微升。 (5)总体积: 10微升。 探针冷竞争反应: (1)Nuclease-Free Water :4微升。 (2)EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X) :2微升。 (3)细胞核蛋白或纯化的转录因子: 2微升。 (4)未标记的探针: 1微升。 (5)标记好的探针: 1微升。 (6)总体积 :10微升。 突变探针的冷竞争反应: (1)Nuclease-Free Water :4微升。 (2)EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X) :2微升。 (3)细胞核蛋白或纯化的转录因子 :2微升。 (4)未标记的突变探针: 1微升。 (5)标记好的探针: 1微升。 (6)体积 :10微升 Super-shift反应: (1)Nuclease-Free Water:4微升。 (2)EMSA/Gel-Shift结合缓冲液(5X) :2微升。 (3)细胞核蛋白或纯化的转录因子:2微升。 (4)目的蛋白特异抗体 :1微升。 (5)标记好的探针:1微升。 (6)总体积 :10微升。 2.   按照上述顺序依次加入各种试剂,在加入标记好的探针前先混匀,并且室温(20-25℃)放置10分钟,从而消除可能发生的探针和蛋白的非特异性结合,或者让冷探针优先反应。然后加入标记好的探针,混匀,室温(20-25℃)放置20分钟。 3.   加入1微升EMSA/Gel-Shift上样缓冲液(无色,10X),混匀后立即上样。注意:有些时候溴酚蓝会影响蛋白和DNA的结合,建 议尽量使用无色的EMSA/Gel-Shift上样缓冲液。如果对于使用无色上样缓冲液在上样时感觉到无法上样,可以在无色上样缓冲液里面添加极少量的蓝色的上样缓冲液,至能观察到蓝颜色即可。 五、 电泳分析 1.  用0.5XTBE作为电泳液。按照10V/厘米的电压预电泳10分钟。预电泳的时候如果有空余的上样孔,可以加入少量稀释好的1X 的EMSA上样缓冲液(蓝色),以观察电压是否正常进行。 2.   把混合了上样缓冲液的样品加入到上样孔内。在多余的某个上样孔内加入10微升稀释好的1X的EMSA/Gel-Shift上样缓冲液 (蓝色),用于观察电泳进行的情况。 3.   按照10 V/厘米的电压电泳。确保胶的温度不超过30℃,如果温度升高,需要适当降低电压。电泳至EMSA/Gel-Shift上样缓 冲液中的蓝色染料溴酚蓝至胶的下缘1/4处,停止电泳。 4.   剪一片大小和EMSA胶大小相近或略大的比较厚实的滤纸。小心取下夹有EMSA胶的胶板,用吸水纸或普通草纸大致擦干胶板边 缘的电压液。小心打开两块胶板中的上面一块(注:通常选择先移走硅烷化的那块玻璃板),把滤纸从EMSA胶的一侧逐渐覆盖住整个EMSA胶,轻轻把滤纸和胶压紧。滤纸被胶微微浸湿后(大约不足1分钟),轻轻揭起滤纸,这时EMSA胶会被滤纸一起揭起来。把滤纸侧向下,放平,在EMSA胶的上面覆盖一层保鲜膜,确保保鲜膜和胶之间没有气泡。 5.  干胶仪器上干燥EMSA胶。然后用X光片压片检测,或用其它适当仪器设备检测。
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睿铂赛实验中心平台拥有的主要仪器:

Beckman Navios流式细胞分析仪,ABI 7500实时荧光定量PCR仪,奥林巴斯倒置荧光显微镜IX71等

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