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实验中心

PCR

2017-06-21

聚合酶链反应(PCR),是以cDNA为模板,利用变性,退火和延伸多步骤、多循环来扩增目的DNA片段。在该反应过程中,目的DNA产量呈指数增长,使一些极为微量DNA样品检测成为可能。具有反应特异性强,灵敏度高,简单快捷,对样品纯度要求低等特点。


  实验步骤:


    1. 样品获取、处理和制备


        1.1 悬浮细胞:将悬浮细胞1×106 个/mL培养液倒入离心管中,离心沉淀细胞。PBS冲洗2次,将细胞离心底部,向离心管中加入500-1000μl Trizol,然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。


     1.2 贴壁细胞:用胰酶消化细胞1×106个/mL,离心PBS冲洗2次,将细胞离心底部,向离心管中加入500-1000μl Trizol,然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。


     1.3 组织:采集新鲜组织100mg,放入离心管中,做好标记,于液氮冷冻片刻后,置于-80度冰箱保存。


     1.4 血液:用抗凝管收集的全血1mL,加入RNA保护剂,做好标记,置于-80度冰箱保存。


   2. DNA质控

 

   3. PCR扩增


   4. 琼脂糖凝胶电泳


  我们提供:

  1. 抽取的DNA和电泳图

  2. 操作步骤及详细的试剂和耗材

  3. 引物序列

  4. 琼脂糖电泳图

  5. 原始数据及处理后的正式实验数据


  结果示意图:

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   服务周期:

 

服务内容

说明

价格∕元

实验周期

DNA抽提

抽提方法 

40元∕标本

5个工作日

PCR

目的片段 

60元∕反应

7个工作日

 

 温馨提醒:

         细胞样本106以上,收集后-80度保存;组织标本100mg标本;血清或血液1mL以上,干冰运输 



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