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实验中心

Realtime PCR 实验

2017-06-21


实时荧光定量PCR技术是在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号累积实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该技术不仅实现了对DNA模板的定量而且具有灵敏度高、特异性和可靠性更强、能实现多重反应、自动化程度高、无污染性、具实时性和准确性等特点。


实验步骤:


     1. 样品获取、处理和制备


         1.1 悬浮细胞:将悬浮细胞1×106 个/mL培养液倒入离心管中,离心沉淀细胞。PBS冲洗2次,将细胞离心底部,向离心管中加入500-1000μl Trizol,然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。

         1.2 贴壁细胞:用胰酶消化细胞1×106个/mL,离心PBS冲洗2次,将细胞离心底部,向离心管中加入500-1000μl Trizol,然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。

         1.3 组织:采集新鲜组织100mg,放入离心管中,做好标记,于液氮冷冻片刻后,置于-80度冰箱保存。

         1.4 血液:用抗凝管收集的全血1mL,加入RNA保护剂,做好标记,置于-80度冰箱保存。

  

  2. RNA或DNA质控


    3. 反转录


    4. 引物验证


    5. qPCR过程


    6. 数据分析


  我们提供:


  1. 抽取的RNA和电泳图及逆转录的cDNA样本

  2. 操作步骤及详细的试剂和耗材

  3. 引物序列

  4. 溶解曲线和扩增曲线

  5. 原始数据及处理后的正式实验数据

 

  实验器材:

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  结果示意图:

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服务周期:


服务内容

说明

价格

实验周期

RealtimePCR

相对定量-染料法

170元∕基因∕样本

7个工作日

相对定量-探针法

190元∕基因∕样本

7个工作日

绝对定量-染料法

220元∕基因∕样本

7个工作日

绝对定量-探针法

220元∕基因∕样本

7个工作日

miRNA-RealtimePCR

提供试剂盒

280元∕基因∕样本

10个工作日

不提供试剂盒

650元∕基因∕样本

10个工作日

探针合成


询价


 

  温馨提醒:


      1. 细胞样本106以上,收集后-80度保存;组织标本100mg标本;血清或血液1mL以上,干冰运输

      2.  单基因10个样本以上

      3.  试验周期不包括探针、标准品合成时间

      4.  公司默认的抽提方式TRIZOL,如果需要试剂盒抽提,则需要客户提供

 



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