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实验中心

慢病毒包装

2017-06-22

慢病毒载体可以将外源DNA有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达目的序列的效果。对于一些较难转染的细 胞,如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等,使用慢病毒载体,能大大提高外源DNA的转导效率。根据构建好的基因过表达、RNA干扰、miRNA表达/抑制慢病毒载体,将重组病毒质粒及其辅助包装质粒共转染至包装细胞中,收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液,对其浓缩后得到高滴度的慢病毒浓缩液,在293T细胞中测定病毒滴度。


  技术路线 :  


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技术特点:


       慢病毒载体包装之后成为假病毒颗粒后,可用于

       1.  感染原代细胞

       2.  制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株

       3.  in vivo的基因操作

       4.  转基因动物,特别是转基因大鼠的制备

 

我们提供:


      1.  提供1-5ml 滴度>108或109TU/ml慢病毒,并提供对应的空病毒对照

      2.  提供滴度测定报告一份

      3.  慢病毒包装所需试剂耗材、仪器设备、操作过程一份

 

结果示意图:



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服务周期:


服务内容

说明

价格

实验周期

载体构建(提供10ug)

基因过表达载体

基因<1.0Kb

询价

2周

1.0Kb <基因<2.0Kb

询价

2-3周

2.0Kb<基因<3.0K

询价

2-3周

基因>3.0Kb

询价

2-3周

RNA干扰载体

shRNA载体3份并筛选出最佳

询价

3周

miRNA过表达载体

询价

2周

miRNA抑制载体

询价

2周

荧光素酶靶基因报告载体

询价

2周

慢病毒包装

一般纯化

滴度>1X108 TU/ml   提供量1ml

询价

2周

滴度>1X108 TU/ml   提供量5ml

询价

2周

 

温馨提示:


     1.  慢病毒在-80℃保存6个月,滴度不会明显下降。建议保存6~12个月以上的样品,进行实验前,重新测一次滴度

     2.  慢病毒应尽量避免反复冻融(小于3次)

     3.  所有操作均应尽量在BSL2级生物安全柜中进行,并佩戴一次性口罩和手套,尤其要避免病毒接触口、 眼、鼻、耳、伤口等身体开放性区域

     4.  使用前从-80℃取出病毒,立即放在37℃水浴锅中,轻轻晃动,使其尽快溶解,操作过程应置于冰盒上进行

     5.  用不完的病毒可以暂时放在4℃冰箱中,但**尽快用完

 



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