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实验中心

激酶筛选与分析

2019-01-21

我们的激酶测定法可测量化合物对激酶活性的影响。激酶筛选可以低,中和高通量的方式进行。我们的自由选择设置使客户可以从我们的产品组合中选择激酶的一部分,以测试任意数量的化合物。高通量激酶筛选可用于cherry-picking,化合物管理和IC50跟踪选项。 蛋白质激酶测定法采用基于金标准放射性同位素的测定法形式,可提供可再现的高质量数据,直接测量酶的活性,这意味着您无需担心其他检测形式引起的假阳性和阴性。 可以使用ATP竞争性,底物竞争性和变构抑制剂进行激酶筛选。我们的许多激酶测定无需修饰即可适用于任何蛋白质或肽底物。 我们的放射性激酶测定可准确测量酶的活性。测试物质的激酶筛选结果以抑制百分比或IC50值的形式提供。将您的测试物质发送给我们,我们将提供全面的分析和筛选结果。


HotSpot™和33 PanQinase™:两种放射性测定形式

放射激酶活性测定的原理。 33磷酸盐转移到基板上。 然后对放射性激酶底物进行定量

我们提供了两种放射性测定形式,可在美国和德国的筛选设施中进行。两种测定均基于33 P标记的磷酸盐从ATP向激酶底物的转移。然而,该方法在磷酸化底物的保留和检测方面有所不同。通过将反应混合物点样在滤膜上,可以捕获HotSpot™分析中的蛋白质和多肽(在美国执行)。在33 PanQinase™测定(在德国进行)与的FlashPlate微量滴定板,涂有闪烁体检测进行。

优势:

辐射测定法格式是激酶筛选的金标准,可产生可再现的高质量数据,并直接测量酶活性。直接检测到催化产物(磷酸化的肽或蛋白质)。避免了由间接检测格式引起的误报和漏报。 HotSpotTM 和 33PanQinaseTM测定法允许 检测 ATP-的作为 以及 作为 底物 的竞争变构 抑制剂HotSpot™分析无需修饰即可适用于任何蛋白质或肽底物。 

下载有关“激酶分析和筛选-选择生化分析平台”的全面概述

美国测试:

设置:单次重复筛查或5或10个浓度的IC50值测定。其他筛选格式可根据要求提供。 

ATP浓度: 1 uM,10 uM或表观ATP-Km至100 uM

对照:无抑制剂对照(DMSO载体),对于每种激酶,均以10剂量IC50格式测试一种激酶特异性对照化合物。 

周转时间:标准项目为10个工作日。可以在研究开始之前安排快速的日程安排和数据传送。 

报告:原始数据,酶活性百分比和对照化合物IC50值将以Excel格式报告,用于单剂量测定。对于IC50订单,原始数据,IC50值和曲线拟合将以Excel格式提供。 
可根据要求提供测定条件,靶标和底物信息。在开始研究之前,应注意此信息的要求。

化合物要求:简而言之,对于激酶少于50个的标准项目,需要20ul的10mM DMSO原料或固体物质。

德国测试:

设置:单剂量筛选或10种浓度的IC50值测定。其他筛选格式可根据要求提供。

ATP浓度:表观ATP-Km

控件:仅DMSO控件。

周转时间:标准项目为10个工作日。可以在研究开始之前安排快速的安排和数据传送

报告:将提供详细的报告,包括测定条件,靶标和底物信息。原始数据和酶活性%将在Excel中报告,包括IC50值和曲线拟合(如果适用)。 

化合物要求:简而言之,对于少于33种激酶的标准项目,应使用100 µl储备液或*高分析浓度的100x固体物质。


通过选择我们715种激酶的任意组合创建您自己的激酶分析,或选择我们的每月激酶组:


Wild Type Kinase Panel (376 Kinases)  

Mutant Kinase Panel  (289 Kinases)   

Atypical Kinase Panel (24 Kinases)  

Lipid Kinase Panel (17 Kinases)  

All Kinase Assays  (Full Kinase Panel:715)

Not included in any panel (9 kinases)


需要咨询更多信息,请联系技术服务部  

amanda

Tel:18221539964  

邮箱:service@rebiosci.net



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