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热变换分析测量目标蛋白质的热稳定性和配体与蛋白质结合时蛋白质熔解温度的增加。蛋白质熔化可用于鉴定配体,缓冲条件,辅因子和影响蛋白质稳定性的药物。反应生物学现在为读取器结构域蛋白提供热转移测定,包括溴结构域,染色单体和其他甲基读取器。
使用的仪器:
BCFX384(BioRad)
免费Bromodomain海报
在存在或不存在(+) - JQ1的情况下RBC BRD2-Tndm(His)的差示扫描荧光测定法。通过增加染料SYPRO Orange的结合和荧光来检测BRDT-Tndm(His)的热变性。添加BET Bromodomain抑制剂/配体(+) - JQ1稳定蛋白质折叠并将Tm从41摄氏度转变为44摄氏度。