产品描述Cell Counting Kit-8 简称 CCK-8 试剂盒，是一种基于 WST-8 的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。 CCK-8 试剂中含有 WST–8：化学名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐，它在电子 载体的作用下被细胞线粒体中的一些脱氢酶还原生成橙黄色的 formazan。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大， 则颜色越浅。对于同样的细胞，颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。 WST-8 是 MTT 的一种升级替代产品，和 MTT 或其它 MTT 类似产品如 XTT、MTS 等相比有明显的优点。首先，MTT 被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的 formazan 不是水溶性的，需要有特定的溶解液来溶解；而 WST-8 和 XTT、MTS 产生 的 formazan 都是水溶性的，可以省去后续的溶解步骤。其次，WST-8 产生的 formazan 比 XTT 和 MTS 产生的 formazan 更 易溶解。再次，WST-8 比 XTT 和 MTS 更加稳定，使实验结果更加稳定。另外，WST-8 和 MTT、XTT 等相比线性范围更宽， 灵敏度更高。 WST-8 和 WST-1 相比，检测灵敏度更高，更易溶解，并且更加稳定。 本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测，也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测，或一 些药物诱导的细胞生长抑制检测。 本试剂盒检测非常便捷。试剂盒仅一管已经配制好的含有 WST-8 的 CCK-8 溶液，无须再进行任何配制等操作。无须使 用同位素，所有的检测步骤仅在同一块 96 孔板内完成。不必洗涤细胞，不必收集细胞，也不必采用额外的步骤去溶解 formazan。 可以用于大批量样品的检测。 酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。 WST-8 对细胞无明显毒性。加入 WST-8 显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，便于找到 *佳测定时间。应用细胞增殖与毒性检测保存条件2~8°C 避光保存，-20°C 避光长期保存使用方法1. 所有的管子在打开之前需要先离心。2. 使用96孔板进行检测时，通常细胞增殖检测实验每孔加入100 μL 2000个细胞，细胞毒性检测实验每孔加入100 μL 5000 个细胞(具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定)。在培养箱中孵育 24 小时。3. 根据实验需要，进行培养并给予 0~10μL 特定的药物刺激。 4. 根据实验目的，进行孵育。 5. 每孔加入 10 μL CCK-8 Solution6. 5%CO2，37℃孵育 0.5~4 小时。7. 在 450nm 测定吸光度。 如无 450nm 滤光片，可以使用 420~480nm 的滤光片。可以使用大于 600nm 的波长，例如 650nm，作为参考波长进行 双波长测定。注意事项：1. 使用前该试剂盒需要在室温解冻2. 每个样品建议设置 5 个复孔。3. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。4. 5%CO2，37℃孵育 0.5-4 小时，对于大多数情况孵育 1 小时就可以了。时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况 而定，初次实验时可以在 0.5、1、2 和 4 小时后分别用酶标仪检测，然后选取吸光度范围比较适宜的一个时间点用于后续实 验。5. 每孔加入 10 μL 1% SDS 或 0.1 M HCL，盖好盖子，避光室温保存，可以延迟测量吸光值的时间警告！ 使用前，请仔细阅读说明书，为了您的安全，请佩戴手套，护目镜，或是其他保护措施。本试剂盒仅用于研发，不可药用， 家庭或其他

订购信息货号规格价格Q2483-250 Tests 250 Tests ￥468.00Q2483-500 Tests500 Tests￥838.00Cell proliferation assays have been widely used to assess cell cycle regulatory factors such as growth factors, cytokines, mitogens, and drugs. Tetrazolium salts (e.g. MTT, XTT, WST-1 and WST-8) are especially useful for assaying the quantification of viable cells, because they are cleaved to form a formazan dye only by metabolic active cells. MTT Cell Proliferation Assay Kit provides a convenient tool for studying the induction and inhibition of cell proliferation in vitro. In this assay, MTT is taken up by cells due to its net positive charge and the plasma membrane potential. It is reduced to formazan by intracellular NAD(P)H-oxidoreductases. This kit also allow investigators to screen drug candidates involved in regulation of cell cycle.概述MTT细胞增殖检测试剂盒（MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit）被广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测。MTT可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物Formazan，在特定溶剂存在的情况下，可以被完全溶解，然后通过酶标仪可以测定570 nm波长附近的吸光度。应用细胞增殖与毒性检测组份Component A: MTT; Component B: MTT Solvent; Component C: Formazan Solubilization Solution250 Tests 500 Tests Component A: MTT Reagent12.5 mg X 125 mg X 1Component B: MTT Solvent 1.25 mL X 2 5 mL X 1 Component C: Formazan Solubilization Solution 27.5 mL X 1 27.5 mL X 2