描述CellTracker™CM-DiI是一种红色荧光染料，非常适合监测细胞运动或位置。加载到细胞中后，染料得到很好的保留，可以对细胞运动进行多代跟踪。红色激发/发射光谱非常适合与绿色荧光染料和蛋白质复用。化学结构分子式：C 68 H 105 Cl 2 N 3 O分子量：1051.5CAS名称/编号：3H-吲哚，5 - [[[4-（氯甲基）苯甲酰基]氨基]甲基] -2- [3-（1， 3-二氢-3,3-二甲基-1-十八烷基-2H-吲哚-2-亚基）-1-丙烯基] -3,3-二甲基-1-十八烷基 - 氯化物180854-97-1•荧光信号保留> 72小时（通常为3至6代）•红色激发/发射光谱（*大553/570 nm）适用于多重化•低细胞毒性 - 不影响活力或增殖•与DiI相比，水溶性提高CellTracker™CM-DiI荧光染料设计为可以自由地通过细胞膜进入细胞，在那里它被转化为细胞不渗透的反应产物。CellTracker™荧光染料经过几代保留在活细胞中。这些染料被转移到子细胞而不是细胞群中的相邻细胞。CellTracker™CM-DiI染料设计用于显示荧光至少72小时，并且染料具有理想的跟踪特性：它在工作浓度下稳定，无毒，在细胞中保留良好，在生理pH下具有明亮的荧光。此外，CellTracker™CM-DiI染料的激发和发射光谱与GFP（绿色荧光蛋白）光谱很好地分离，允许多路复用。产品规格颜色：黄色适用于（设备）：荧光显微镜子细胞定位：细胞膜和脂质检测方法：Fluorescent激发/发射（nm）：553⁄570产品尺寸：20 x50μg运送条件：室内温度储存在冰箱（-5至-30°C）并避光。内容和存储荧光光谱

产品名称产品编号规格保存价格（元）CellTracker Green CMFDA (5-Chloromethylfluorescein Diacetate)活细胞示踪剂CMFDA（绿色）Q251650μg≤-20℃干燥避光500.00Q25162×50μg800.00Q25165×50μg1400.00产品描述CMFDA，英文全称5-chloromethylfluorescein diacetate，是一种可自由透过活细胞膜对细胞进行示踪的荧光染料。CMFDA是二乙酸荧光素（Fluorescein diacetate，FDA）的氯甲基衍生物，具细胞膜渗透性，无色，不具有荧光发光性。当通过被动运输穿透细胞膜进入活细胞后，CMFDA中的亲脂性基团可被胞浆内非特异性酯酶水解，生成5-氯甲基荧光素（5-chloromethylfluorescein）；5-氯甲基荧光素可发出绿色荧光，因带电荷而不能自由穿透细胞膜，并利用自身氯甲基与细胞内蛋白和多肽中的谷胱甘肽在谷胱甘肽巯基转移酶作用下生成加合物，能完好的保留在胞内。经CMFDA标记的细胞，荧光非常稳定，稳定标记的时间可达数天（至少3天），因此非常适用于细胞分化和形态发生等研究。与常用的钙黄绿素和FDA相比，具有较长时间的细胞内信号保留特点。在细胞分裂增殖过程中，CMFDA标记荧光可分配至两个子代细胞中，且具有不会使邻近细胞染色的功能（有极少情况下通过细胞间缝隙连接发生染色）。同时，CMFDA标记荧光还主要用于分析细胞间融合、细胞粘附及多药耐药转运蛋白的研究。此外，CMFDA还可用于与其他细胞示踪染料联合选择性标记感染细胞内的病原菌；与膜不通透性核荧光探针共同使用，可用于细胞活性研究。本品具有细胞示踪试剂理想的特性：稳定、无毒（工作浓度范围内）、细胞内荧光保留性好、强荧光（生理pH范围内）。CMFDA标记细胞呈绿色荧光，Ex=492nm，Em=517nm，可与其他颜色荧光染料，如红色荧光蛋白(red fluorescent protein，RFP）等共染。本品以粉末形式提供，需用DMSO制备储存液后再使用。产品性质中文名称（Chinese Synonym）5-氯甲基荧光素二醋酸酯英文名称（English Synonym）5-chloromethylfluorescein diacetateCAS号（CAS NO.）136832-63-8分子式（Molecular Weight）C25H17ClO7分子量（Molecular Fomular）464.85外观（Appearance）无色固体Ex/ Em492/517nm结构式（Structure） 运输与保存室温运输。-20℃干燥避光保存，有效期一年。避免反复冻融。注意事项1）不同的细胞其细胞内酯酶活性不同，因此染色效果具有差异性。2）荧光染料均存在淬灭问题，染色过程需尽量避光。3）避免使用含有巯基的缓冲液。4）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。操作方法1. CMFDA储存液（10mM）的配制将本品取出回温至室温。用10.8µl DMSO溶解50ug CMFDA，充分混匀即得到10mM的储存液。第一次使用时，建议母液现配现用。且溶解后的试剂尽可能在短时间内使用，以保证实验效果。母液遇水极易分解，若单次不能用完，建议分装保存，用封口膜封口，并严格做到≤-20℃密封干燥保存。【避免反复冻融】【注】：① 本品容易吸潮，从冰箱取出后，请确认在干燥的环境放至室温后再开封。由于试剂极其微量，开封前请将其短暂离心，以保证粉末落入管底。② 所用DMSO必须保证高质量，新鲜无水，否则将会导致醋酸酯水解，使荧光染料无法进入细胞，影响实验效果。③ 建议您在正式实验前先摸索一下细胞量、荧光探针的终浓度、培养时间等，找到*佳实验条件。2. CMFDA工作液（0.5-5µM）的配制使用前用无血清培养基稀释上述储存液至工作液浓度（0.5-25µM），并将探针工作液于37℃预热。【注】：针对不同的实验目的所需的工作液浓度不同，需根据具体情况进行优化。一般来讲：对于长期染色（至少3天）或快速分裂细胞的染色，推荐工作液浓度5-25µM。对于短期染色，如细胞活力分析等实验，推荐工作液浓度0.5-5µM。为避免过度加载造成细胞毒性，维持正常的细胞生理活性，建议在取得有效结果的基础上尽量使用**探针浓度。3. 染色方法3.1 悬浮细胞染色1）离心收集细胞，并吸除上清。用预热的探针工作液轻柔地重悬细胞。2）于细胞正常生长条件下孵育15-45min。3）离心并去除探针工作液。4）换用新鲜培养基继续培养30min。5）清洗细胞，如需固定请参考如下步骤【4.固定和透化】。3.2 贴壁细胞的染色1）吸除培养液。2）轻轻加入预热的探针工作液。3）于细胞正常生长条件下孵育15-45min。4）换用新鲜培养基继续培养30min。5）清洗细胞，如需固定，请参考后续步骤【4.固定和透化】。。4.（可选）固定和通透处理4.1 固定前，细胞需用PBS充分清洗。【注】：当细胞包被在含有巯基或盖玻片表面上时，该清洗步骤尤为重要。4.2 用3.7%多聚甲醛室温固定细胞15min。4.3 固定后于PBS中漂洗细胞。4.4 （可选）后续如进行其他抗体染色，需对细胞进行通透处理，可将上述处理的细胞于预冷的丙酮中孵育10min。5 镜检将上述处理的细胞用PBS漂洗后，进行检测。该探针呈绿色荧光，其Ex=492nm，Em=517nm。