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慢病毒载体可以将外源DNA有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达目的序列的效果。对于一些较难转染的细 胞,如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等,使用慢病毒载体,能大大提高外源DNA的转导效率。根据构建好的基因过表达、RNA干扰、miRNA表达/抑制慢病毒载体,将重组病毒质粒及其辅助包装质粒共转染至包装细胞中,收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液,对其浓缩后得到高滴度的慢病毒浓缩液,在293T细胞中测定病毒滴度。
技术路线 :
技术特点:
慢病毒载体包装之后成为假病毒颗粒后,可用于
1. 感染原代细胞
2. 制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株
3. in vivo的基因操作
4. 转基因动物,特别是转基因大鼠的制备
我们提供:
1. 提供1-5ml 滴度>108或109TU/ml慢病毒,并提供对应的空病毒对照
2. 提供滴度测定报告一份
3. 慢病毒包装所需试剂耗材、仪器设备、操作过程一份
结果示意图:
服务周期:
服务内容 | 说明 | 价格 | 实验周期 | |
载体构建(提供10ug) | 基因过表达载体 | 基因<1.0Kb | 询价 | 2周 |
1.0Kb <基因<2.0Kb | 询价 | 2-3周 | ||
2.0Kb<基因<3.0K | 询价 | 2-3周 | ||
基因>3.0Kb | 询价 | 2-3周 | ||
RNA干扰载体 | shRNA载体3份并筛选出*佳 | 询价 | 3周 | |
miRNA过表达载体 | 询价 | 2周 | ||
miRNA抑制载体 | 询价 | 2周 | ||
荧光素酶靶基因报告载体 | 询价 | 2周 | ||
慢病毒包装 | 一般纯化 | 滴度>1X108 TU/ml 提供量1ml | 询价 | 2周 |
滴度>1X108 TU/ml 提供量5ml | 询价 | 2周 |
温馨提示:
1. 慢病毒在-80℃保存6个月,滴度不会明显下降。建议保存6~12个月以上的样品,进行实验前,重新测一次滴度
2. 慢病毒应尽量避免反复冻融(小于3次)
3. 所有操作均应尽量在BSL2级生物安全柜中进行,并佩戴一次性口罩和手套,尤其要避免病毒接触口、 眼、鼻、耳、伤口等身体开放性区域
4. 使用前从-80℃取出病毒,立即放在37℃水浴锅中,轻轻晃动,使其尽快溶解,操作过程应置于冰盒上进行
5. 用不完的病毒可以暂时放在4℃冰箱中,但**尽快用完