逆转录聚合酶链反应（Reverse transcription PCR，RT-PCR），是将RNA的反转录（RT）和cDNA的聚合酶链式扩增（PCR）相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，利用变性，退火和延伸多步骤、多循环来扩增目的DN**段。在该反应过程中，目的DNA产量呈指数增长，使一些极为微量RNA样品检测成为可能。

实验步骤：

     1. 样品获取、处理和制备

              1.1 悬浮细胞：将悬浮细胞1×106 个/mL培养液倒入离心管中，离心沉淀细胞。PBS冲洗2次，将细胞离心底部，向离心管中加入500-1000μl Trizol，然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。

              1.2 贴壁细胞：用胰酶消化细胞1×106个/mL，离心PBS冲洗2次，将细胞离心底部，向离心管中加入500-1000μl Trizol， 然后置于-80度冰箱保存。或者将离心底部的干细胞置于-80度冰箱保存。

              1.3 组织：采集新鲜组织100mg，放入离心管中，做好标记，于液氮冷冻片刻后，置于-80度冰箱保存。

              1.4 血液：用抗凝管收集的全血1mL，加入RNA保护剂，做好标记，置于-80度冰箱保存。

    2. RNA或DNA质控

    3. 反转录

    4. PCR扩增

    5. 琼脂糖凝胶电泳

  我们提供：

  1. 抽取的RNA和电泳图及逆转录的cDNA样本

  2. 操作步骤及详细的试剂和耗材

  3. 引物序列

  4. 琼脂糖电泳图

  5. 原始数据及处理后的正式实验数据

 结果示意图：

服务周期： 

  温馨提醒：

      1.  细胞样本106以上，收集后-80度保存；组织标本100mg标本；血清或血液1mL以上，干冰运输

      2.  单基因10个样本以上

      3.  试验周期不包括探针、标准品合成时间

      4.  公司默认的抽提方式TRIZOL，如果需要试剂盒抽提，则需要客户提供

      5.  标本公司免费保存一个月，一个月以后自行处理，如果需要邮寄，则需要客户付邮寄费用。