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新闻动态

关于样品的处理(Bioassay kit)

2021-12-03

所有样品都应该是清澈的,没有沉淀物或颗粒。如果有颗粒,应通过离心(例如 14,000 rpm 5 分钟)或通过 0.45 μm 过滤器过滤来去除它们。

建议对新鲜制备的样品进行检测。然而,大多数分析物在适当储存时是稳定的(例如在 4、-20、-80°C 或在液氮中)。

血清样品优于血浆样品,因为血清样品中不存在抗凝剂。然而,对于我们的大多数检测,可以使用血清或血浆。


组织样本. 从 20-100 mg 组织开始,添加 200-1000 μL 冰冷的 PBS。裂解可以通过匀浆(在冰上的 Dounce 匀浆器中通过 10-20 次)或超声处理(*好在冰水浴中进行)来实现。组织裂解的程度可以在显微镜下检查。以 14,000 g 离心匀浆 10 分钟。将清澈的上清液转移到干净的管中。谨慎的做法是对不同稀释度的样品进行试点测试。选择读数在标准曲线检测范围内的稀释液,以进行进一步的分析。如果不立即化验,大多数样品可以储存在 -80°C。

细胞样本。将约200万(2×10 6) 在冰上 400 μL PBS 中收获细胞。裂解可以通过匀浆(在冰上的 Dounce 匀浆器中通过 10-20 次)或超声处理(*好在冰水浴中进行)来实现。细胞裂解的程度可以在显微镜下检查。以 14,000 g 离心匀浆 10 分钟。将清澈的上清液转移到干净的管中。谨慎的做法是对不同稀释度的样品进行试点测试。选择读数在标准曲线线性范围内的稀释液,以进行进一步分析。如果不立即化验,大多数样品可以储存在 -80°C。

如果要使用裂解缓冲液,建议首先运行检测以测试裂解缓冲液中的成分是否会干扰检测。这可以通过运行两条标准曲线来完成:一条在 H 2O(或缓冲液,如果数据表需要)和样品将包含的裂解缓冲液的相同比例制备。如果两条标准曲线相同,则没有干扰,使用裂解缓冲液是安全的。如果标准曲线存在差异,如果标准曲线保持线性,仍可使用裂解缓冲液;然而,用于分析裂解物样品的标准曲线需要在裂解缓冲液中制备。


对于未知样品,应进行试点分析以评估*佳稀释度。准备样品的系列稀释液,并选择与检测检测范围相符的稀释液(*好在标准曲线的中间)。然后以该稀释因子稀释样品并重新运行分析,结果乘以稀释因子。





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