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  • 载体构建

    载体构建

    载体构建是分子生物学研究中最常用的实验技术,是分子生物学研究常用的手段之一。将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。主要包括已有载体多克隆位点MCS的改造和已有载体启动子、增强子、筛选标记等功能元件的改造。载体构建完成后可利用PCR原理进行测序验证 包括:        1. 基因过表达载体构建        2. RNA干扰载体构建        3. miRNA表达/抑制载体构建        4. 荧光素酶靶基因3’UTR报告载体构建        5. 基因突变、载体改造等  技术路线: 我们提供:    1. 含目的片段的质粒、含该质粒的细菌各一份(RNA干扰载体提供三份,并筛选出至少一份干扰效率大于70%)    2. 引物序列、载体图谱一份、测序结果各一份    3. 载体构建实验所需试剂耗材、仪器设备、操作过程一份    4. 免费提供多种工具载体,多种报告基因示踪,多种亲和标签融合可选,以满足研究需要 结果示意图:       服务周期:服务内容说明价格实验周期载体构建(提供10ug)基因过表达载体基因<1.0Kb询价2周1.0Kb <基因<2.0Kb询价2-3周2.0Kb<基因<3.0Kb询价2-3周基因>3.0Kb询价2-3周RNA干扰载体shRNA载体3份并筛选出最佳询价3周miRNA过表达载体询价2周miRNA抑制载体询价2周荧光素酶靶基因报告载体询价2周  温馨提示:载体构建及改造所需的实验方案,目的基因序列及相关背景资料
  • 慢病毒包装

    慢病毒包装

    慢病毒载体可以将外源DNA有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达目的序列的效果。对于一些较难转染的细 胞,如原代细胞、干细胞、不分化的细胞等,使用慢病毒载体,能大大提高外源DNA的转导效率。根据构建好的基因过表达、RNA干扰、miRNA表达/抑制慢病毒载体,将重组病毒质粒及其辅助包装质粒共转染至包装细胞中,收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液,对其浓缩后得到高滴度的慢病毒浓缩液,在293T细胞中测定病毒滴度。  技术路线 :                                  技术特点:       慢病毒载体包装之后成为假病毒颗粒后,可用于       1.  感染原代细胞       2.  制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株       3.  in vivo的基因操作       4.  转基因动物,特别是转基因大鼠的制备 我们提供:      1.  提供1-5ml 滴度>108或109TU/ml慢病毒,并提供对应的空病毒对照      2.  提供滴度测定报告一份      3.  慢病毒包装所需试剂耗材、仪器设备、操作过程一份 结果示意图: 服务周期:服务内容说明价格实验周期载体构建(提供10ug)基因过表达载体基因<1.0Kb询价2周1.0Kb <基因<2.0Kb询价2-3周2.0Kb<基因<3.0K询价2-3周基因>3.0Kb询价2-3周RNA干扰载体shRNA载体3份并筛选出最佳询价3周miRNA过表达载体询价2周miRNA抑制载体询价2周荧光素酶靶基因报告载体询价2周慢病毒包装一般纯化滴度>1X108 TU/ml   提供量1ml询价2周滴度>1X108 TU/ml   提供量5ml询价2周 温馨提示:     1.  慢病毒在-80℃保存6个月,滴度不会明显下降。建议保存6~12个月以上的样品,进行实验前,重新测一次滴度     2.  慢病毒应尽量避免反复冻融(小于3次)     3.  所有操作均应尽量在BSL2级生物安全柜中进行,并佩戴一次性口罩和手套,尤其要避免病毒接触口、 眼、鼻、耳、伤口等身体开放性区域     4.  使用前从-80℃取出病毒,立即放在37℃水浴锅中,轻轻晃动,使其尽快溶解,操作过程应置于冰盒上进行     5.  用不完的病毒可以暂时放在4℃冰箱中,但最好尽快用完 
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