一般建议
1、妥善保存试剂
仔细阅读数据表并将试剂存放在适当的位置。一些套件需要在不同温度下储存不同的组件。
2、平衡试剂以测定温度
使用培养箱或水浴将所有试剂（酶除外）平衡至测定温度。酶应解冻并保存在冰上或在测定期间保持在 4°C。
3、运行测试标准曲线
确保试剂没有任何问题，并确保您仔细按照说明进行操作。除非数据表中另有说明，否则您的标准曲线应该是线性的，并生成与示例图相似的结果。
4、初步样品系列稀释
如果这是您第一次运行特定类型的样品，请使用微量离心管对您的样品进行 2 倍系列稀释。使用原始样品和稀释样品运行测定，以确定是否需要稀释以及＊佳稀释因子。在所有后续实验中使用选择的稀释因子。
5、小心移液
孔之间的一致性非常重要；小心地从孔的一侧移液，确保所有孔的体积相同，所有试剂都流到底部。特别注意避免气泡，这会破坏吸光度读数。
特殊情况：
•检测不工作（无信号）
可能的原因 | 解决方案 |
检测缓冲液太冷，导致酶活性低 | 将试剂平衡至室温或指定的测定温度。 |
在方案中省略试剂或步骤 | 重新阅读数据表并仔细按照说明进行操作。 |
读板波长不正确 | 重新阅读数据表并仔细按照说明进行操作。 |
使用不正确的微孔板 | 吸光度：透明板；
荧光：黑色板（底部可以是透明或黑色）；
发光：白板。 |
•带有特殊信号的样本
可能的原因 | 解决方案 |
不兼容的样品类型 | 重新阅读数据表以获取兼容样品列表。 |
样品制备不当 | 对于酶活性测定，不要对样品进行脱蛋白。脱蛋白会杀死所有酶活性。如果您确实需要去蛋白，请确保您已正确中和您的样品。EDTA 是一种金属螯合剂，会干扰我们的一些检测。任何测量金属离子或需要金属辅因子的测定都与 EDTA 不相容。 |
•信号太高
可能的原因 | 解决方案 |
标准太浓，信号饱和 | 返回数据表并确保正确完成标准稀释。 |
工作试剂制备不正确，信号饱和 | 返回数据表并确保正确制备工作试剂。 |
样品浓度太高 | 稀释样品并重复实验。 |
•信号太低
可能的原因 | 解决方案 |
试剂储存不正确 | 检查试剂是否已正确存放。如果储存不当，它们可能会迅速降解。 |
试剂已过期 | 检查套件的保质期。 |
样品太稀 | 用更多的细胞/组织浓缩或重新制作您的样品。 |
•信号上下跳跃
可能的原因 | 解决方案 |
未混合和不均匀的孔 | 快速敲击盘子数次以彻底混合内容物。 |
well中的气泡 | 检查孔中是否有气泡。重复测定和移液器小心避免气泡。 |
沉淀在well中 | 仔细检查沉淀物或混浊度。确定沉淀的原因并稀释、脱蛋白或使用其他替代样品处理来消除沉淀。 |
•标准曲线不是线性的
可能的原因 | 解决方案 |
移液错误和可变性 | 重新制作标准稀释液，并在小心移液时严格按照说明进行操作。 |
计算错误 | 重新检查计算。一些化验有不同的方程式。 |
标准曲线可能是非线性拟合 | 有关拟合方程和示例图，请参阅数据表。 |
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