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实验中心

细胞粘附

2017-06-22

细胞粘附分子(cell adhesion molecules,CAMs) 是一类膜表面糖蛋白,它们以配体-受体特异性结合的方式介导细胞与细胞间、细胞与细胞外基质间的相互接触和结合并调节细胞功能,在胚胎发育和分化、正常组织结构的维持、炎症反应、免疫应答、凝血和血栓形成、创伤修复、肿瘤浸润与转移等许多生理和病理过程中发挥重要的生物学作用。

  

实验步骤:


    1. 用10ug/ml的Fn预铺96孔板,70ul/孔,4℃过夜后,PBS洗3遍

    2. 再用1% BSA于37℃封闭1h,PBS洗3遍

    3. 待测细胞培养至对数生长期,消化细胞,用无血清培养基悬浮细胞,用血球计数板计数,调整浓度为5*105/ml

    4. 分别接种于预铺Fn的96孔板中,每孔5000个细胞,每组设3个复孔。37 ℃孵育1 h后,PBS洗去未黏附的细胞

    5. 5%戊二醛于4 ℃固定0.5 h,PBS 洗3遍;0.1%的结晶紫染色,室温静止0.5 h,PBS洗3 遍

    6. 每孔加入100μl 10%的乙酸,5~10 min后用酶标仪检测595nm的吸光度值,用以表示黏附细胞的多少

    7. 或者按照每孔加入100 ul甲醇,固定15min

    8. 每孔加入100 ul吉姆萨染液,染色15min,PBS洗去染液

    9. 倒置显微镜下随机取5个随机视野计数粘附细胞数量病拍照,统计结果


服务周期:


服务内容

说明

价格∕元

实验周期

细胞粘附

建议3重复

1200元/板

5个工作日

 

温馨提醒:


若用酶标仪计数为步骤1-6;若需要照片用步骤1-4,7-9

 



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