加入收藏
您好,欢迎光临睿铂赛!
实验中心

Tunel(凋亡)

2017-06-22

TUNEL是分子生物学与形态学相结合的一种研究方法。细胞凋亡过程中,染色体DNA发生双链断裂或单链断裂,从而产生大量带有游离3'末端的DNA片段。脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)可以将荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸化酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而对凋亡细胞或凋亡小体进行原位染色,检测细胞凋亡。TUNEL法是在细胞和组织层次上进行生物学反应,结果直观,便于观察;可检测出极少量的凋亡细胞,灵敏度远比一般的组织化学和生物化学测定法要高。

 

实验步骤:


   1. 充分脱蜡和水化

   2. 3%过氧化氢甲醇中浸洗10min,抑制内源性过氧化氢酶

   3. 用蛋白酶K(20μg/ml溶于Tris/HCl中,pH7.4~8.0)室温孵育15min

   4. PBS洗2次,每次5min,擦干样品周围的水

   5. 此阶段配制TUNEL反应混合物——从试剂2中取出100μl标记溶液作为两个阴性对照;将试剂1中取5μl+试剂2中45μl标记液中,配成50μl TUNEL反应混合物混匀(即配即用,4℃避光)

   6. 标记反应:滴加50μl的TUNEL反应混合液,在湿盒中37℃孵育60min。PBS洗3次,每次5min,至此样品可在荧光显微镜下(绿色)分析结果

   7. 信号转化和分析:擦干样品周围的水分,加入50ul转化剂-POD,湿盒中37℃孵育30min。PBS洗5min*5次

   8. 加入50~100μl DAB底物溶液,室温(10~25℃)孵育5 min,PBS洗5min*3次

   9. 中性树胶或者甘油封片(在封片前可以复染),光镜下分析结果


我们提供:


   1. 提供完成实验的玻片

   2. 提供具体的实验方法、步骤、所用试剂、仪器、及相关分析数据等,实验结果将以电子或书面形式提交给您


结果示意图: 


                       filename

 

服务周期:


服务内容

说明

价格∕元

实验周期

Tunel凋亡

提供白片

询价

3个工作日

 

温馨提醒:


   1. 提供新鲜的组织、固定过的组织、石蜡包埋的组织、细胞爬片、石蜡切片、冰冻切片

   2. 提供具体的拍照部位 



加载中
  • 电话咨询
  • 400-7780-786
  • 021-34681336
您是第 1403146 位访客!