Site-directed Mutagenesis Kit 定点突变试剂盒
产品描述定点突变试剂盒可用于点突变,核苷酸替换和删除或者插入单一或多个相邻核苷酸。本试剂盒可简单、快速和高效地引
入正确的目的突变,可将多达 12 个寡苷酸插入和/或删除到双链的长达 8 kb 的质粒中。整个过程(包括转化)可在 3 小时内
完成。
为得到目的突变位点,需设计两个含有中心突变位点的互补诱变引物。这两个引物在目标载体上退火到相反的链上,然
后 Pfu DNA Polymerase 利用引物扩增整个目标载体。PCR 扩增产生大量带缺刻的开环突变质粒。然后用 Dpn I 限制性内切
酶消化残留的甲基化模板和任何半甲基化的 DNA。带缺刻的 DNA 载体含有目标突变位点,被转化到 DH5α 感受态细胞后载
体的缺刻得到修复。
2.68 kb 的 pUC19 对照质粒的 Hind III 限制性酶切位点序列的“AG”发生移码突变,突变位点在 lacZα 基因上。突变的对
照质粒在含有 X-galactosidase (X-gal)的平板上表现为白色菌落。对照质粒同时含有氨苄青霉素抗性;因此筛选时,使 E. coli
生长在含有氨苄青霉素(和 X-gal )的平板上。另外,pUC19 对照质粒不能被 Hind III 酶切。根据对照实验,pUC19 对照
质粒的回复突变可被 Hind III 切割。产品订购信息:产品名称货号规格储存价格(元)Site-Directed Mutagenesis Kit 定点突变试剂盒Q2468-S10 rxn-20℃606.00Site-Directed Mutagenesis Kit 定点突变试剂盒Q2468-L20 rxn-20℃1010.00应用改造基因、改造酶的不同活性或者动力学特性、改造启动子或者DNA作用元件、引入新的酶切位点、药物研发、基因治疗组份10x Pfu Buffer with MgSO4, 5x GC-rich Buffer with MgSO4, 25 mM MgSO4 Solution, 10 mM dNTP Mix, Pfu DNA Polymerase, Dpn I, pUC19 White Control Plasmid, Control Forward Primer, Control Reverse Primer, Sterilized ddH2O, Protocol